ДЕТЕКТОРЫ

Оцените статью

Ключевым моментом в создании детекторов для ВЭКЭ является совместимость объема их измерительной ячейки с размером капиллярной колонки (dc = 10-100 мкм). Длина капилляра, занимаемая пробой, lmj и «окно детектирования» ldet практически (за исключением КЭОХ) не зависят от диаметра капилляра. Допустимые значения величин lmj = ldet и Vd приведены в табл. 1.4. Относительно невысокая концентрационная чувствительность детекторов требует, чтобы проба субнанолитрового объема имела достаточно высокую концентрацию. Ввод разбавленных проб в больших, чем указано в табл. 1.4, объемах может осуществляться при использовании предконцентрирования.

Известно множество детекторов для капиллярного электрофореза [18] (табл. 1.5). Наиболее чувствительное детектирование обеспечивает прямая флуориметрия с предколоночной деривати- зацией, непрямая флуориметрия с ионным вытеснением или получением ионных пар и амперометрия, наиболее чувствительная в пульсирующем варианте [24]. Именно эти виды детектирования наиболее часто используют в ВЭКЭ. Камнем преткновения в развитии методов ВЭКЭ явился поиск высокочувствительного универсального детектора, аналогичного СФ-детектору в ВЭЖХ,

который в ВЭКЭ при направлении светового луча поперек капилляра малочувствителен, поскольку оптический путь равен диаметру капилляра (dc <<100 мкм).

По-видимому, проблема может быть решена при использовании непрямой флуориметрии [25], основанной на вытеснении аналитом растворенного в электролите флуорофора и уменьшении вследствие этого фоновой флуоресценции. Предельно детектируемую концентрацию вещества при непрямом детектировании определяют по уравнению

Сйп = ^ /(DR■ TR), (1.24)

где ст — концентрация детектируемого компонента подвижной фазы электролита (моль/л), DR — динамический диапазон детектора, TR — коэффициент вытеснения аналитом детектируемого компонента (TR = 1-20).

При ионном вытеснении флуорофора (10 -4-10-5 моль/л) и при DR =103, TR = 1 можно детектировать вещества в концентрации 10-7-10-8 моль/л. Предельно детектируемую массу вещества qlim определяют по уравнению

qlim clim Vd. (1.25)

Оптимальное применение различных видов ВЭКЭ для разделения ионов, амфотерных соединений и неэлектролитов показано в табл. 1.6.

Таблица 1.6. Разделение с помощью ВЭКЭ

Образец Риск поверхностной адсорбции Предлагаемый механизм разделения Необходимость модификации капилляра
Ионы в кислой среде Да КЗЭ+ Да
То же Нет КЗЭ- Нет
Ионы в щелочной среде ,, — КЗЭ- ,,
Ионы в широкой области рН ,, КЗЭ (ЭО) ,, —
Ионы одного знака (катионы или анионы) Да/Нет КИТ Да
Амфотерный Да/Нет КИЭФ Да
Ионы и неэлектролиты Нет КЗЭ (ЭО) Нет
Неэлектролиты ,, — МЭКХ ,, —

Примечание. КЗЭ (ЭО) — КЗЭ, комбинированный с злектроосмосом; «+» — детектирование на катоде; «-» — детектирование на аноде.

Как отмечалось выше, в настоящее время методы ВЭКЭ стремительно развиваются и находят применение для многих задач аналитической био- и химической технологии, в производстве и анализе фармацевтических препаратов (см. гл. 4 и 5).

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх