ИОННАЯ СИЛА ПРОБЫ

Оцените статью

Хотя буферные растворы с большой ионной силой повышают растворимость белков, их не следует использовать в качестве матриц при КЭ-разделениях. Существует обратная зависимость между электрофоретической подвижностью и концентрацией ионов: превышенная концентрация ионов в пробе (особенно при ее больших объемах) неблагоприятно сказывается на разделении в КЭ (см. рис. 2.1, б), уменьшая приложенную к пробе эффективную напряженность электрического поля, замедляя миграцию ионов анализируемого вещества и затрудняя фокусировку пробы. Помимо этого, когда ионы пробы поступают в сепарационный буфер, они создают градиент ионной силы небольшой длины, что дополнительно влияет на целостность зоны анализируемого вещества. При электрокинетической инжекции избыток ионов в пробе, уменьшая напряженность электрического поля, снижает миграцию или перенос анализируемых веществ в капилляр. Следовательно, при сравнении приготовленных в воде чистых стандартов с приготовленными в сыворотке или в солевых растворах наблюдается 2-5- кратное снижение сигнала детектора, что затрудняет количественное определение при инжекции такого типа.

Применение инжекции под давлением к матрице пробы большой ионной силы приводит к расширению полосы или наложению пиков (рис. 2.1, б). Эти эффекты более выражены при увеличении объемов пробы (рис. 2.1). Наиболее существенный недостаток при таких условиях разделения — уменьшение стэкинга (концентрирования пробы). Ниже будут описаны способы преодоления неблагоприятного влияния солей, присутствующих в пробе.

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх