Главная / Здоровье / Капиллярный электрофорез 1 / Изотахофоретический стэкинг

Изотахофоретический стэкинг

Оцените статью

Иногда в роли начального электролита выступает хроматный электролит, а перевод пробы в конечный электролит осуществляется путем добавления от 40 до 80 мкМ октансульфоната натрия NaOS в электролит [36]. Это добавление благоприятно, потому что NaOS не виден на электрофореграмме из-за гидрофобного механизма образования ионных пар («хвост-к-хвосту») при добав-

лении в качестве модификатора электроосмотического потока ал- кил-четвертичного амина. NaOS уменьшает также сопротивление высокочистых проб, т. к. для обеспечения протекания тока через пробу при ее загрузке необходим определенный уровень фоновой проводимости. Электромиграционный процесс обогащения пробы включает 4 этапа (рис. 2.9). Капилляр и электрод помещаются в пробу (рис. 2.9, I), к которой прикладывается напряжение «5 кВ (рис. 2.9, II). Ионы в пробе, включая анионную добавку (NaOS), начинают мигрировать в капилляр. Поскольку проба имеет существенно меньшую проводимость, чем электролит, в области пробы напряженность электрического поля будет выше. Это обеспечивает более высокую подвижность анализируемых компонентов по сравнению с электролитом. Когда ионы анализируемых компонентов достигают границы раздела с зоной электролита, которая называется границей концентраций, они там накапливаются, и начинается процесс стэкинга из-за более низкой напряженности поля на границе. Стэкинг продолжается до тех пор, пока не будет достигнуто устойчивое изотахофоретическое состояние (рис. 2.9, III). Устойчивое состояние наступает, когда проводимость в зонах анализируемых компонентов приближается к проводимости электролита, при которой электрические поля становятся одинаковыми. С этого момента дальнейшего обогащения пробы почти не происходит. Тогда капилляр и пробу снова помещают в электролит, чтобы начать анализ (рис. 2.9, IV).

Изотахофоретический стэкинг: прямое детектирование по электропроводности. Те же правила относятся к электромиграционному обогащению в случае детектирования по электропроводности. Поскольку используется электролит с низкой подвижностью по сравнению с исследуемыми анализируемыми компонентами, для поддержания изотахофоретических условий (ИТФ) перед загрузкой пробы в капилляр требуется ввести высокочистое основание. Вклад ионного загрязнения от основания в электрофореграм- му можно компенсировать путем вычитания площадей соответствующих пиков, полученных при вводе основания под давлением без пробы, из электрофореграммы пробы. Пределы обнаружения, достижимые при детектировании по электропроводности в условиях ИТФ-стэкинга и электромиграционной инжекции, могут достигать уровня 50 триллионных долей для катионов и 100 трилли- онных долей для анионов, при этом требуется всего 1 мл пробы [37].

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх