Главная / Здоровье / Капиллярный электрофорез 1 / МАТРИЧНЫЕ ЭФФЕКТЫ И РАЗДЕЛЕНИЕ

МАТРИЧНЫЕ ЭФФЕКТЫ И РАЗДЕЛЕНИЕ

Оцените статью

Наряду с беспрецедентным разрешением, универсальными аналитическими возможностями, дешевизной и чувствительностью анализа одной из главных привлекательных черт капиллярного электрофореза в массовом анализе является простота подготовки пробы. Во многих случаях, кроме разбавления, никакой подготовки не требуется. Но, хотя введенная в капилляр проба составляет лишь небольшую часть его общего объема (< 1 %), матрица пробы оказывает сильное влияние на разделение, количественные результаты и воспроизводимость ВЭКЭ. Это влияние связано с природой электропроводности, когда любое небольшое изменение или различие в ионной силе вдоль пути прохождения тока сказывается на электроосмотическом потоке (ЭОП), миграции ионов, ширине полосы и, следовательно, на всем процессе разделения. Кроме того, матрица пробы может воздействовать на стенки капилляра. Для сравнения, в высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) матрица пробы мало влияет или вовсе не влияет на процесс разделения [1]. Полученные из биологических жидкостей, пищевых продуктов и промышленных источников пробы часто имеют сложную матрицу. Они могут содержать большое количество соединений, концентрации которых в несколько тысяч раз превышают концентрации исследуемых веществ. Например, часто анализируемый лекарственный препарат теофиллин присутствует в сыворотке в количестве 10 мг/л вместе с натрием концентрацией 10 000 мг/л и белками в концентрации 100 000 мг/л. Для успешного КЭ при такой сложной матрице требуются специальные процедуры. Усложняет дело также сравнительно низкая чувствительность КЭ при СФ-детектировании из-за малой оптической длины светового луча при прохождении капилляра. Поэтому КЭ-анализ требует для улучшения детектирования обогащения пробы в сравнении с ВЭЖХ. Влияние матрицы пробы на разделение в ВЭКЭ стало очевидным с момента зарождения этого метода [2]. Число теоретических тарелок, характеризующее эффективность разделения, оказывается гораздо выше в случае разбавления пробы в воде, а не в электрофоретическом буферном растворе. Во многих случаях, если анализ соединения в чистом растворителе легко осуществим методом ВЭКЭ, то анализ того же соединения в биологической жидкости выполнить намного труднее, особенно при ограниченной информации о влиянии матрицы.

В данной главе подробно рассматриваются различные факторы пробы, которые могут влиять на разделение, количественное определение и воспроизводимость в КЗЭ и МЭКХ. К ним относятся ионная сила, присутствие белков, органические растворители, рН, вязкость и объем пробы.

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх