МЕТОДЫ ВВОДА ПРОБЫ

Оцените статью

а. Инжекция под давлением. В режиме инжекции под давлением в капилляр вводятся нанолитровые порции пробы. Разностное давление прикладывается одним из трех способов: 1) во входной части капилляра; 2) c использованием вакуума в выходной части капилляра; 3) c использованием силы тяжести в качестве сифона.

Объем пробы, вводимой в капилляр, вычисляется путем определения скорости загрузки пробы с помощью уравнения Пуазейля:

Реальные объемы инжекции не так важны, как процентное соотношение между длиной введенной порции пробы и длиной капилляра до детектора. В качестве отправной точки при разработке методик полезно использовать правило 1 %-й длины порции пробы. При детектировании по электропроводности хорошее разделение получается, когда длина вводимой порции пробы менее 1 %. Благодаря увеличению электрического поля в зоне пробы происходит электроконцентрирование (электростэкинг), обеспечивая хорошую эффективность разделения. Чтобы лучше понять, как движутся ионы в электрическом поле, требуется рассмотреть несколько уравнений. Скорость миграции анализируемых компонентов изменяется в зависимости от напряженности приложенного электрического поля Е, определяемой выражением

Поскольку величина и пропорциональна величине электрического поля, при более высоких значениях Е получаются большие и. Более высоких напряженностей электрического поля можно добиться, если ионная сила в определенной зоне (зоне пробы) будет ниже, чем у окружающего электролита. Поэтому важно разбавлять пробу, если это возможно, водой высокой чистоты, а не электролитом. Если разбавление пробы невозможно, напряженность поля можно увеличить, повысив ионную силу электролита. Концентрацию электролита следует увеличивать постепенно, малыми приращениями, чтобы предотвратить другие дисперсионные эффекты, например избыточное джоулево нагревание или изменение избирательности [33]. Если использовать рассмотренную выше концепцию коионов, пределы обнаружения при вводе пробы под давлением будут зависеть от метода детектирования и состава электролита. При непрямом УФ-детектировании диапазон пределов детектирования составляет от 80 до 500 миллиардных долей для обычных неорганических анионов при объеме пробы около 40 нл. При уменьшении объема пробы на 80 % пределы детектирования в случае детектирования по электропроводности составляют от 8 до 50 миллиардных долей. Диапазон значений концентраций для непрямого УФ-детектирования при количественном анализе составлял от 100 до почти 100 сотен миллионных долей [34].

б. Электромиграция. Изотахофоретическое концентрирование (стэкинг): непрямое УФ-детектирование. Для достижения более низких пределов обнаружения, чем при инжекции под давлением, основанной на концентрировании ионов в нанолитровых объемах пробы, вводимой в капилляр, необходимо осуществить предварительное концентрирование анализируемых компонентов пробы еще до анализа. В электроинжекционном методе ввода пробы ионы анализируемого вещества можно концентрировать из больших объемов пробы (от 1 до 4 мл) путем подачи на пробу напряжения величиной несколько кВ. Описано электромиграционное обогащение в случае анионов неорганических веществ с пределами детектирования в диапазоне триллионных долей [34]. Для оптимизации изотахофоретического стэкинга во время загрузки пробы используется регуляризирующая функция Кольрауша [35]:

elektroforez-13

Рис. 2.9. Четыре этапа электромиграционного обогащения в соответствии с регулирующей функцией Кольрауша.

□ — анионы анализируемого вещества, о — коионы электролита, х — анионная добавка для получения конечного электролита [33].

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх