Главная / Здоровье / Капиллярный электрофорез 1 / ОБЪЕМ ПРОБЫ И ПАВ В ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОМ БУФЕРНОМ РАСТВОРЕ

ОБЪЕМ ПРОБЫ И ПАВ В ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОМ БУФЕРНОМ РАСТВОРЕ

Оцените статью

Лучше использовать пробу большого объема, чтобы повысить чувствительность детектирования в МЭКХ. Однако на практике высота пиков не слишком растет с увеличением объема пробы. Более того, число тарелок и вообще разделение быстро ухудшаются с увеличением размера пробы из-за увеличения размывания полос при передозировке пробы. В КЗЭ объем инжектируемой в капилляр пробы, не приводящий к передозировке, зависит от концентрации рабочего буфера, или точнее от отношения концентраций рабочего буфера и буфера с пробой. Высокое отношение позволяет вводить больший объем пробы, следовательно, получать более высокие пики. В МЭКХ, наоборот, разделение зависит от распределения анализируемого вещества между псевдофазой мицелл и водным буфером, или константы емкости (k’); при этом ионная сила рабочего буфера мало или совсем не влияет на оптимальный размер пробы. Тем не менее высокая концентрация ДСН в рабочем буфере вызывает увеличение высоты пиков (рис. 2.4, б). Концентрация ДСН может сильно влиять на высоту пиков [21], особенно при сравнительно больших объемах пробы (рис. 2.4). Однако высокая концентрация ДСН может также приводить к нежелательным последствиям, например к избыточному току, увеличению времени миграции и неоптимальному разрешению.

elektroforez-8

Рис. 2.4. Влияние концентрации ДСН в рабочем буфере на высоту пиков, время миграции и разделение.

Инжекция в течение 10 с; 1 — ацетаминофен, 2 — кофеин, 3 — ацетоацетанилид, 4 — фелбамат [23]

На практике концентрацию ДСН в буфере следует оптимизировать по чувствительности (высоте пиков), разрешению, а также времени анализа. Увеличение высоты пиков отражает увеличение числа теоретических тарелок N (рис. 2.4, б). N пика фелбамата возрастало с ~12 000 до 35 000 и затем до 96 000 при увеличении концентрации ДСН с 0.8 до 1.6 % и затем до 3.2 % соответственно. Помимо увеличения N при увеличении концентрации ДСН увеличивалось время миграции и улучшалось разделение. Высота тарелки Н вследствие продольной диффузии (при t0/tmc>1) определяется выражением

Увеличение концентрации ДСН, приводящее к повышению k (рис. 2.4, б) и к уменьшению коэффициента диффузии, вызывает, таким образом, уменьшение Н.

Messenger free

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх