ВВОД ПРОБЫ

Оцените статью

Проба вводится в ПКЭ несколькими способами.

Электрокинетический способ. Конец капилляра погружается в сосуд с анализируемым раствором пробы и прикладывается стабилизированное напряжение, строго ограниченное по времени. В капилляр за счет электроосмоса и электрофореза втягивается проба. При этом массовое соотношение компонентов в отобранной пробе изменяется по сравнению с исходным, поскольку ионы разного заряда и нейтральные молекулы пробы обладают различной электрофоретической подвижностью. Следовательно, за равный промежуток времени в капилляр поступят разные порции каждого компонента. Если же электроосмос отсутствует (при модификации капилляра) или в значительной степени подавлен (при большой ионной силе электролита), то в капилляр попадут преимущественно ионы, знак которых соответствует знаку электродного сосуда. Положительный эффект этого явления связан с концентрированием ионов подобного аналита (в 100-150 раз).

Гидродинамический способ. Проба засасывается в капилляр, заполненный электролитом, одним из методов:

повышения давления в высоковольтном сосуде;
вакуумирования заземленного сосуда;
сифонирования при повышении уровня высоковольтного сосуда с пробой над уровнем заземленного сосуда.
Методы 1) и 2) требуют термостатирования капилляра (стабилизации вязкости электролита), стабилизации рН и ионной силы электролита.

Ввод пробы с предконцентрированием. Главный вариант этого метода — сочетание изотахофореза с капиллярным электрофорезом [22]. Проба засасывается в предкапилляр вместе с лидирующим и терминальным электролитами. После достижения стационарной стадии изотахофореза лидирующий электролит отводится в сторону, а нужная для анализа часть разделяющейся пробы путем электромиграции переводится в рабочую колонку для ВЭКЭ-

анализа. Если концентрация электролита с0 меньше сх, определяемой законом Кольрауша,

Для концентрирования пробы наиболее эффективен так называемый «стэкинг» — процесс многократного концентрирования при вводе пробы в разбавленном рабочем буфере относительно рабочего электролита [23] (гл. 2).

Следует отметить, что ввод пробы в ПКЭ — это важнейший элемент эффективной работы капиллярного электрофореза. Рекомендуется [21] во избежание дополнительного размывания при работе на ПКЭ использовать пятистадийную процедуру ввода пробы: 1 — подача пробы в капилляр с контролем параметров ввода (температуры Т, напряжения V при электроосмотическом вводе, давления Р, разности уровней сосудов Н, времени экспозиции At при гидродинамическом вводе); 2 — удаление пробы с наружной поверхности капилляра; 3 — собственно электрофорез с контролем рабочих параметров (Т, V, ионной силы, рН); 4 — промывание капилляра рабочим буфером или слабым раствором щелочи в случае немодифицированного капилляра, а затем буфером; 5 — заполнение капилляра буфером.

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх