Главная / Здоровье / Капиллярный электрофорез 2 / МЭКХ-анализ содержания фенитоина в плазме

МЭКХ-анализ содержания фенитоина в плазме

Оцените статью

Метаболит каннабиноидов, тетрагидро-каннабинол-карбоновая кислота, также может определяться в моче методом МЭКХ после твердофазной экстракции с пределом обнаружения до 10 мкг/мл [82]. Морфин-3-глюкуронид можно определять в моче менее чем за 10 мин с помощью КЗЭ или МЭКХ [83]. При прямом вводе мочи предел обнаружения составлял ~20 мкг/мл, что ниже, чем для ВЭЖХ. Однако при использовании кассет из С8 для экстракции проб мочи предельные обнаруживаемые концентрации морфин-3- глюкуронида понижались до 1 мкг/мл. Бензодиазепины (например, диазепам, лоразепам, оксазепам) выделялись из мочи методом МЭКХ после гидролиза и экстракции с помощью растворителя [84]. Пробы мочи подвергались экстракции с помощью хлороформа-изопропанола (9 : 1), и было показано, что КЭ-разделение лучше иммуноанализа с точки зрения чувствительности и специфичности. Сравнение трех вариантов КЭ (МЭКХ, КЗЭ, капиллярного

изотахофореза) в анализе сыворотки и мочи больных с передозировкой лекарств на содержание таких препаратов, как барбитураты, ацетаминофен и салицилаты, показало, что все три метода пригодны для быстрой (< 30 мин) качественной идентификации [85]. Отмечалось, что изотахофорез требовал особого внимания к выбору лидирующего и терминирующего буферов. МЭКХ хорошо было использовать для разделения кислотных, основных и нейтральных лекарственных препаратов за один цикл анализа. При условии, что концентрация лекарства достаточно высока, допускался прямой ввод сыворотки или мочи без экстракции. Недавно сообщалось об использовании прямого ввода сыворотки (ПВС) при анализе содержания лекарств (рис. 5.2) [86]. Schmutz и Thor- mann оценивали влияние физико-химических свойств на время

kapilar-21

Рис. 5.2. МЭКХ-анализ содержания фенитоина в плазме [86].

Кремниевый капилляр 75 мкм и эффективной длиной 68 см; буфер: 10 мМ фосфата, 6 мМ тетрабората, 6 М мочевины, 150 М додецил- сульфата, рН 9.7. Условия разделения: 25 кВ, Т = 35 °С; детектирование на X = 215. а — сыворотка от больного, проходившего курс лечения фенитоином; б — чистая сыворотка: 1 с в вакууме (127 мм рт. ст.). 1 — триптофан, 2 — фенобарбитал, 3 — мочевая кислота, 4 — фенитоин

миграции и форму пиков 25 лекарств в МЭКХ-ПВС. Использовался буфер с pH = 9.2, содержавший 6 мМ Na2B4O7, 10 мМ Na2HPO4 и 75 мМ ДСН. Было найдено, что элюирование зависит от гидро- фобности, порядок миграции определяется порядком увеличения коэффициентов соотношения октанола и воды. Для определения Р-блокаторов буфер модифицировался путем добавления изопропанола (2-10 % по объему). Как указано в гл. 2, на форму пиков мигрирующих лекарственных веществ, введенных в сыворотку, влияет матрица пробы. Лекарственные вещества с рКа, близкими к величине pH буферного раствора (основные лекарственные вещества), и все лекарственные вещества с низкой или нулевой способностью связывания белков плазмы (РРВ) имели острые пики. Соединения с высокой РРВ и значениями рКа значительно ниже pH буфера (кислотные лекарственные вещества) имели широкие или двойные пики. Кроме того, было показано, что РРВ не ухудшает количественное определение, т. к. при высокой концентрации додецилсульфата при МЭКХ-анализе связанные с белком вещества высвобождаются. Поэтому уровни лекарств, определяемые с помощью МЭКХ-ПВС, представляют собой общую концентрацию, т. е. данные, которые обычно используются при диагностике и мониторинге лекарств в организме, а также в фармакологических исследованиях. В заключение отмечалось, что в случае катионных поверхностно-активных веществ (ПАВ) следует ожидать осаждения белков, что ограничивает реализацию МЭКХ-ПВС для некоторых типов ПАВ.

МЭКХ использовалась также для выделения анаболических стероидов и тестостероновых эфиров [87]. МЭКХ, ВЭЖХ и капиллярная ГХ сравнивались при исследовании качественного и количественного определения анаболических стероидов [88]. Значение времени удерживания (или миграции) и линейная концентрационная зависимость хорошо согласовывались между собой во всех трех методах для более чем 20 анаболических стероидов, часто встречающихся в судебно-медицинской практике. Во всех исследованиях МЭКХ-анализ проводился с использованием 75 мМ ДСН в 10 мМ фосфат-, 10 мМ боратном буфере при pH = 9.0 с 40 % ацетонитрила при напряжении 25 кВ и температуре 30 °С.

Описан КЗЭ-анализ ряда диуретиков, Р-блокаторов и наркотических анальгетиков, нелегально принимаемых некоторыми спортсменами [89]. При использовании простого боратного буфера диуретики выявлялись в течение 12 мин, а два других класса соединений можно было идентифицировать в течение 5 мин. Пределы обнаружения были от 10 до 250 фмолей на инъекцию или от 0.1 до 10 мкМ в пробе. Относительное среднеквадратичное отклонение колебалось от 0.2 до 2.6 % для времени миграции и от 3 до 7 % для площади пиков, что сравнимо со значениями, полученными методами ВЭЖХ. Отмечалось преимущество простой фильтрации мочи перед прямым вводом. Чувствительность удавалось повысить за счет применения ЛИФ-детектирования [90].

play poker

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх