Главная / Здоровье / Капиллярный электрофорез 2 / Микроскопные и волоконно-оптические системы

Микроскопные и волоконно-оптические системы

Оцените статью

Распространены наиболее широко, но были исследованы и другие подходы, например система с одной линзой, умеренно усложненной цилиндрической линзой и зеркалом [64]. Система с высокой эффективностью собирания излучения (50 %) базируется на высокоэффективном параболическом отражателе (рис. 3.5, г) [65]. Сочетая высококачественный лазерный фильтр и хороший полосовой фильтр с маской, блокирующей небольшую долю флуоресцентного излучения, можно убрать большую часть рассеянного излучения. В этой системе пределы детектирования по концентрации находятся в начале пикомольного диапазона.

Многомерное детектирование флуоресценции. Кроме одноканального детектирования, разработаны и различные многом

ерные подходы. Два наиболее распространенных — использование излучения с разрешением по длине волны и многокапиллярные системы.

Разрешение по длине волны. Разработаны многоканальные системы с заранее заданным и фиксированным количеством каналов в заранее выбранных интервалах длин волн с использованием полосовых или дихроических фильтров для разделения излучения в двух или четырех каналах. Для сбора данных от каждого участка длин волн в этих системах используются одноканальные детекторы [61, 6668]. Наиболее надежными для спектроскопии слабых излучений и систем визуализации являются детекторы на приборах с зарядовой связью (ПЗС) [69-71]. Описана система на базе ПЗС, в которой применялась 2 см зона наблюдения (обычно < 100 мкм). Оптическая система проецирует изображение этого участка капилляра на входной щели формирующего изображения спектрометра [64]. Во время разделения зона анализируемого вещества движется вниз

kapilar-6

Рис. 3.6. Схема оптической системы для капиллярного электрофореза с разрешением по длине волны [43]

по капилляру, а ее изображение — через ПЗС. Если скорость вывода сигнала ПЗС синхронизировать с перемещением зоны анализируемого вещества, эффективное время интегрирования будет равно полному времени пребывания этой зоны в освещенной области. При использовании такой синхронизации (метод интегрирования с временной задержкой) были получены пределы детектирования на уровне 10-12 М для FITC-меченых аминокислот [64, 72]. Описаны также ПЗС-система, предназначенная для секвениро- вания ДНК и позволяющая различать 4 основания с использованием отдельной метки для каждого из них с различными спектрал ь- ными характеристиками [73], и система на основе усиленной матрицы фотодетекторов и ряда лазеров с улучшенными техническими характеристиками [74]. Чувствительность детектирования с разрешением по длине волны повышается использованием системы на ПЗС до 50 фМ или 50 молекул для сульфородамина 101 (рис. 3.6) [43]. Описана идентификация анализируемых веществ на основе спектральных свойств, например флуоресцентные методики секвенирования ДНК [61, 66-68, 73, 74].

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх