Главная / Здоровье / Реакции организма / Экспериментальные исследования влияния физических, химических и биологических факторов на тиолдисульфидную систему животных

Экспериментальные исследования влияния физических, химических и биологических факторов на тиолдисульфидную систему животных

Оцените статью

Вместе с сотрудниками кафедры гигиены труда (зав. — д.м.н. проф. С.В. Алексеев) изучали влияние интенсивного шума на состояние антиоксидантной защиты организма животных [83, 84].

Методы исследования

Белых крыс-самцов (масса 200-220 г), помещенных в звукозаглушенную камеру, подвергали в течение 3 часов ежедневному воздействию широкополосного стабильного шума с уровнем интенсивности 90 дБ. Шум создавали с помощью генератора типа Г2-12, усилителей LV-102 и акустической системы, разработанной ВНИИ радиоприема и акустики. Акустические измерения проводили акустической аппаратурой фирмы «Bruel, Kjaer» (Дания).

Общая продолжительность шумового воздействия составляла 90 дней. Перед началом воздействия и далее на его протяжении через 5, 10, 30, 60 и 90 дней определяли окислительновосстановительное состояние ТДС в крови, нервной ткани (головной мозг), сердечной мышце и надпочечниках животных, измеряя концентрацию в них сульфгидрильных (тиоловых) и дисульфидных групп и величину тиолдисульфидного отношения (ТДО). Одновременно определяли также активность ферментов АОЗ: глютатионредуктазы (КФ 1.6.4.2), лактатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.27), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.49), каталазы (КФ 1.11.1.6). С целью оценки интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ) измеряли скорость образования малонового диальдегида по тиобарбитуровому тесту. Одновременно обследовались животные контрольной группы, не подвергавшиеся шумовому воздействию.

Концентрацию HS-групп определяли методом амперометрического титрования нитратом серебра с платиновым индикаторным электродом и меркуриодидным электродом сравнения с потенциалом +0.02 В относительно нормального водородного электрода [85, 86]. Для определения концентраций —S—S-групп использовали прием «обратного» амперометрического титрования, предложенный в связи со следующими соображениями [87]. Измерение количества дисульфидных связей обычно основано на восстановительном их расщеплении, что делает возможным определение эквивалентного количества образующихся при этом сульфгидрильных групп. Трудности, возникающие в данном случае, обусловлены выраженной склонностью таких SH-групп (особенно в белках) к реоксидации кислородом, присутствующим в растворе. Способ, позволяющий предупредить это явление путем титрования HS-групп в непрерывном токе азота, сильно усложняет работу и делает ее более трудоемкой. В связи с этим восстановительное расщепление дисульфидных связей (сульфитом натрия) проводили в присутствии избытка ионов серебра, которые блокируют HS-группы в момент их образования, препятствуя последующей их оксидации. Оставшиеся свободными, т. е.

не принявшие участия в формировании меркаптидных связей, ионы металла оттитровывали раствором 2,3-димеркаптопропансульфоната натрия (унитиола).

В доказательство корректности результатов измерений по описанной методике приведем следующие данные (полученные на людях). Тиолдисульфидное отношение крови здоровых людей обоего пола в возрасте 18-24 лет, измеряемое с помощью этого метода в Санкт-Петербурге, колебалось в пределах 2.4-3.6 (Л.Л. Гончарова, Л.П. Родионова, неопубликованные данные). Сходные данные (2.4-4.0) были получены в Казахстане [88]. Одновременное измерение ТДО в параллельных пробах методами амперометрического и кулонометрического титрования предпринял на Северном Кавказе С.В. Зиц [89], который при исследовании крови здоровых и больных хроническим гломерулонефритом людей обнаружил, что оба метода дали одинаковые результаты.

Средняя величина ТДО цельной крови здорового человека, равная 3.0, недавно была установлена методом, основанным на использовании вольтамперометрического анализатора «ИВА-5», толстопленочных графитовых электродов и иных, нежели в наших исследованиях, реагентов, необходимых для блокирования HSгрупп и расщепления S—S-связей [90].

ссылка

Оставить комментарий

Ваш email не будет опубликован. Поля для обязательного заполнения *

*

Подняться вверх